Por V. Palya; T. Tatár-Kis; T. Mató, B. Felföldi;Y. Gardin; y E. Kovács- Ceva Salud Animal
En décadas pasadas, se produjeron importantes cambios en los genotipos del virus de ND (NDV) que han sido identificados como los prevalentes en la avicultura. La vacunación juega un papel importante en la prevención de la enfermedad.
En el presente estudio, se probó la eficacia de la vacuna recombinante de herpesvirus de pavos (HVT) que expresa el gen F de una cepa genotipo I del NDV (Vectormune® ND) contra cepas velogénicas de NDV, que representan a los genotipos presentes en Latinoamérica (Genotipos V, VII y VIId).
Materiales y métodos
Se evaluó la vacuna rHVT-NDV criopreservada asociada a células (Vectormune® ND) que expresa la proteína F de la cepa avirulenta D26/76 de genotipo I de NDV.
Las cepas de virus de desafío se aislaron de campo y se propagan en huevos embrionados SPF. Todos demostraron estar libres de agentes extraños. El aislado que representa el genotipo V aislado en México en 2008 (identificación: D516/1 MX, GenBank JQ002630). Como representante del genotipo VIIb, fue seleccionada una cepa de NDV peruana de 2005 (D575/6 PE).
Esta cepa de desafío muestra 98% de homología de nucleótidos en la secuencia del gen F parcial con la cepa identificada como: Aves / Perú / 1918-03 / 2008 cepa. La cepa perteneciente al genotipo VIId utilizada en el estudio, corresponde a un aislado chino con alto grado de similitud genética con un aislamiento venezolano NDV descrito por Perozo y colaboradores.
Se conformaron dos grupos, uno que recibió la vacuna rHVT- NDV por vía subcutánea al día de vida y otro grupo control no vacunado. A los 28 días de edad, los 30 pollos vacunados y los 30 pollos control fueron sometidos al desafío (se conformaron 3 subgrupos de 10 aves en ambos grupos, de acuerdo con el virus de desafío utilizado). El desafío se realizó con una dosis de 5log10 ELD50 por pollo, vía intra-nasal.
Luego del desafío se monitorearon signos clínicos y mortalidad diariamente. Adicionalmente, se realizaron hisopados oro-nasales y cloacales 2, 4 y 7 días después del desafío. A partir de estas muestras se determinó la carga de ARN de NDV. El ARN se extrajo de las muestras de hisopo por QIAxtractor Virus Kit (Qiagen). Luego, se realizó la prueba de RT-PCR cuantitativo para la amplificación de un fragmento del gen M (TaqMan® NDV y controles, Life Technologies).